Il-Coronavirus tas-Sindrome tad-Dijarrea Akuta tal-Ħnieżer (SADS-CoV) huwa koronavirus patoġeniku enteriku tal-ħnieżer li għadu kif ġie skopert li jista 'jikkawża dijarea idemmgħu fil-qżieqeż tat-twelid u jikkawża telf ekonomiku sinifikanti lill-industrija tal-ħnieżer.Fil-preżent, m'hemm l-ebda metodu seroloġiku xieraq biex tiġi evalwata l-effettività tal-infezzjoni u l-vaċċin SADS-CoV, għalhekk hemm bżonn urġenti li jintuża analiżi immunosorbenti marbuta mal-enżimi (ELISA) effettiv biex tpatti għal din id-defiċjenza.Hawnhekk, inbena plasmid rikombinanti li jesprimi proteina SADS-CoV spike (S) mdewba mad-dominju IgG Fc tal-bniedem biex jipproduċi baculovirus rikombinanti u espress f'ċelloli HEK 293F.Il-proteina S-Fc hija purifikata bir-reżina tal-proteina G u żżomm ir-reattività ma 'antikorpi Fc anti-bniedem u anti-SADS-CoV.Imbagħad il-proteina S-Fc intużat biex tiżviluppa ELISA indiretta (S-iELISA) u tottimizza l-kundizzjonijiet ta 'reazzjoni ta' S-iELISA.Bħala riżultat, bl-analiżi tal-valur OD450nm ta '40 serum negattiv SADS-CoV ikkonfermat b'assaġġ ta' immunofluworexxenza (IFA) u Western blotting, il-valur tal-qtugħ ġie ddeterminat li jkun 0.3711.Il-koeffiċjent tal-varjazzjoni (CV) tas-6 serum pożittivi għal SADS-CoV fi ħdan u bejn ġirjiet ta' S-iELISA kienu kollha inqas minn 10%.It-test tar-reattività inkroċjata wera li S-iELISA m'għandu l-ebda reattività inkroċjata ma' serum ieħor tal-virus tal-ħnieżer.Barra minn hekk, abbażi tas-sejbien ta' 111-il kampjun ta' serum kliniku, ir-rata ta' koinċidenza ġenerali ta' IFA u S-iELISA kienet ta' 97.3%.It-test tan-newtralizzazzjoni tal-virus b'7 valuri OD450nm differenti tas-serum wera li l-valur OD450nm misjub minn S-iELISA kien korrelatat b'mod pożittiv mat-test tan-newtralizzazzjoni tal-virus.Fl-aħħarnett, S-iELISA sar fuq 300 kampjun tas-serum tar-razzett tal-ħnieżer.Kitts kummerċjali ta 'enteroviruses porċini oħra wrew li r-rati pożittivi IgG ta' SADS-CoV, TGEV, PDCoV u PEDV kienu 81.7%, 54%, u 65.3%, rispettivament., 6%, rispettivament.Ir-riżultati juru li l-S-iELISA hija speċifika, sensittiva u riproduċibbli, u tista 'tintuża biex tiskopri l-infezzjoni SADS-CoV fl-industrija tal-ħnieżer.Dan l-artikolu huwa protett bid-drittijiet tal-awtur.id-drittijiet kollha riżervati.
Ħin tal-post: Ġunju-22-2021